TOPICS
トピックス

Corynebacterium glutamicumコリネバクテリウム・グルタミクムにおけるタンパク質生産の強化

• バイオテクノロジー生産を産業的に競争力のあるものにするためには、培地とプロセスの最適化が非常に重要です
• ボトルネック:
  クローン作製とGMO改良から、培地とプロセスの最適化へシフト
• 解決策:
  RoboLector® Proは、バッチおよび流加培養の、培地調整の完全自動化、オンライン測定(濁度、蛍光、DO、pH)が可能
• 上清に分泌される組み換え脂肪分解性クチナーゼ
• 活性は光学測定で酵素アッセイをモニター
• RoboLector®でCorynebacterium glutamicum培養におけるCGXⅡ最少培地の最適化

培養培地の最適化

図1 液体培養でのクチナーゼ活性強化のための自動培地調製と培地最適化
0、10、20mg/L硫酸マンガンと、様々な濃度の硫酸鉄、硫酸マグネシウムの4Dプロット

送液方法の最適化

• 産業プロセスの多くの場合、流加培養アプローチを採用
• スクリーニングは、現実的なその後の工業規模へのスケールアップのために、同様の条件下で行われるべき
• RoboLector® Proにより
• BioLector® Proマイクロ流路による準連続供給
• 分注機による振とう中のMTPへアクセス
  ⇒ボーラス供給とサンプリング

プロセスコントロール(フィーディング、pH)
オンラインモニタリング(バイオマス、pH､DO、蛍光)
自動サンプリングと培地準備

図2 バイオマス形成とクチナーゼ活性強化のためのC.glutamicum培養のフィード戦略スクリーニング
培地CGXⅡは前もっての最適化に基づき:400mg/L硫酸マグネシウム、25mg/L硫酸鉄、20mg/L硫酸マンガン。フィードレートはグラフに表示されているように、0.1μL/hの直線増加

図3 最適化されたCGXⅡ培地でのC.glutamicumの流加培養

本資料はm2p社から提供されました。

資料は以下のリンクボタンからダウンロードしていただけます。
アプリケーションノート(フルバージョン:英語)をご覧になりたい場合は以下のお問い合わせボタンからご依頼ください。